如何選擇合適您細(xì)胞分選的MACS分選柱

更新時(shí)間：2021-07-05 瀏覽次數(shù)：6437

美天旎分選柱（Column）是MACS技術(shù)的核心，其特點(diǎn)如下：填充有不同規(guī)格的鐵珠，可分選或者去除10^7-10^10細(xì)胞；表面親水包被，不損傷細(xì)胞，同時(shí)保證流速；可以將磁場放大1000-10000倍，因此只需少量的細(xì)胞表位被識(shí)別即可被磁場捕獲，從而為后續(xù)實(shí)驗(yàn)預(yù)留足夠抗原表位，如磁珠分選后的細(xì)胞無需切除磁珠即可直接染流式抗體，而不受影響。

美天旎的分選柱分幾類，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區(qū)別呢，您在實(shí)驗(yàn)中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？

我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來分析如何選擇恰當(dāng)?shù)姆诌x柱：

陽性分選
1、根據(jù)要分選的細(xì)胞數(shù)量選擇分選柱：

MS柱容納的細(xì)胞上樣量是2×10^8細(xì)胞（既包含陽性細(xì)胞又包含陰性細(xì)胞），而其能捕獲的陽性細(xì)胞是10^7。
LS分選柱細(xì)胞上樣量是2×10^9細(xì)胞（既包含陽性細(xì)胞又包含陰性細(xì)胞），而其能捕獲的陽性細(xì)胞是10^8。

2、目的細(xì)胞是常見細(xì)胞還是稀有細(xì)胞
為了在分選稀有細(xì)胞（表達(dá)率<5%）時(shí)得到較更高的純度，您可以使用兩個(gè)分選柱：用一根分選柱進(jìn)行一次分選后，陽性成份再過一次新的分選柱。在陽性分選中，過兩次分選柱可以獲得更高純度的細(xì)胞。

3、大體積的細(xì)胞
另外，如果您要分選的目的細(xì)胞是體積較大的特殊細(xì)胞，如原生動(dòng)物細(xì)胞、人皮膚郎罕式細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、心肌細(xì)胞等，那推薦您使用Large cell columns。因?yàn)榇蠹?xì)胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細(xì)胞順利通過。

去除分選
去除分選中需要考慮以下幾個(gè)因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達(dá)強(qiáng)還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細(xì)胞？
根據(jù)這幾個(gè)因素，您可以選擇合適的去除分選柱。

注意：某些MACS Cell Isolation Kits先進(jìn)性去除分選（第一步分選），然后進(jìn)行陽性分選（第二步分選）。請使用說明書中推薦的分選柱。

三、分選柱對(duì)應(yīng)搭配的分選器（磁力架）的推薦

1、MS分選柱和Large Cell Columns，適配的分選器為單通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。

2、LS和LD分選柱或 Whole Blood Columns，適配的分選器為單通道的midiMACS或者4通道的QuadroMACS。

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