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你在使用紫外分光光度計(jì)時(shí)有注意過(guò)以下這些事項(xiàng)嗎?
更新時(shí)間:2020-06-26 瀏覽次數(shù):1790
紫外分光光度計(jì)采用新型的光學(xué)結(jié)構(gòu)及C-T式單色器以及優(yōu)質(zhì)的電路系統(tǒng)設(shè)計(jì),使儀器具有波長(zhǎng)精度高,重復(fù)性好,雜散光低及長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性和高性價(jià)比,可滿足各種層次的分析應(yīng)用所需,若配上軟件,可與PC連接,實(shí)現(xiàn)更多的測(cè)試功能包括數(shù)據(jù)海量存貯。
結(jié)構(gòu)與功能:
由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五大部分組成。
光源:是提供符合要求的入射光的裝置,有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區(qū),一般為鎢燈和鹵鎢燈,波長(zhǎng)范圍是350~1000nm;氣體放電光源用于紫外光區(qū),一般為氫燈和氘燈,連續(xù)波長(zhǎng)范圍是180~360nm。
單色器:功能是將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束,它是分光光度計(jì)的心臟部分。
吸收池:又稱比色皿,供盛放試液進(jìn)行吸光度測(cè)量之用,其底及兩側(cè)為毛玻璃,另兩面為光學(xué)透光面,為減少光的反射損失,吸收池的光學(xué)面必須*垂直于光束方向。根據(jù)材質(zhì)可分為玻璃池和石英池兩種,前者用于可見光光區(qū)測(cè)定,后者用于紫外光區(qū)。
檢測(cè)器:是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置,測(cè)量吸光度時(shí),并非直接測(cè)量透過(guò)吸收池的光強(qiáng)度,而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為電流信號(hào)進(jìn)行測(cè)試,這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測(cè)器。
信號(hào)顯示系統(tǒng):是將檢測(cè)器輸出的信號(hào)放大,并顯示出來(lái)的裝置 [2] 。
紫外分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng):
1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對(duì)使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時(shí),手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定,以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度Zui大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng),除另有規(guī)定外吸收度Zui大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以內(nèi)。
5、供試品應(yīng)取2份,如為對(duì)照品比較法,對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作,每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
6、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。